Peritonitis primaria por neumococo en un hospital pediátrico de Argentina / Primary pneumococcal peritonitis in a pediatric hospital from Argentina

Resumen La peritonitis por neumococo comprende un pequeno subconjunto de pacientes con enfermedad invasiva (ENI). Durante 15 años (2005-2020) de vigilancia de ENI en un hospital de pediatría, se detectaron 5 casos de peritonitis primaria. Los pacientes, 3 ninas y 2ninos con una media de edad de 5 anos, experimentaron signos y síntomas peritoneales; 3 de ellos presentaban síndrome nefrótico. En coincidencia con los perfiles locales, todos los aislamientos fueron sensibles a betalactámicos, una cepa expresó resistencia a tetraciclina y cotrimoxazol y otra solo a cotrimoxazol. Los serotipos encontrados en 4/5 cepas (una resultó no viable) fueron 1, 19F, 15C y 23A. Los ninos fueron tratados con cefalosporinas de tercera generación o con ampicilina, gentamicina y metronidazol; todos evolucionaron favorablemente. Se destaca la importancia del hallazgo de Streptococcus pneumoniae en peritonitis primarias en niños. Este trabajo contribuye al conocimiento de esta enfermedad en particular y al de la epidemiología local de la ENI.

Abstract Pneumococcal peritonitis represents a small subset of patients suffering from inva-sive pneumococcal disease (IPD). We describe 5 cases of primary peritonitis documented in the pediatric hospital over 15 years (2005-2020) of IPD surveillance. The patients, 3girls and 2boys with a mean age of 5 years, experienced peritoneal signs and symptoms; 3of them suffered from nephrotic syndrome. Based on the local resistance profiles, all isolates were sensitive to beta-lactams, one strain showed resistance to cotrimoxazole and tetracycline while another strain, to cotrimoxazole only. Serotypes found in 4/5 strains (one was non-viable) were: 1, 19F, 15C and 23A. Children were treated with third-generation cephalosporins or ampicillin, gentamicin and metronidazole and all of them evolved favorably. Pneumococcal etiology should be included in the differential diagnosis of acute abdominal pain in children. Our study aims to contribute to the knowledge of this condition and to the local epidemiology of IPD.

Beta-lactam antibiotics and viridans group streptococci / Antibióticos beta-lactámicos y estreptococos grupo viridans

Abstract The aim of this review is to present an update on the susceptibility of viridans groupstreptococci (VGS) to -lactam antimicrobials, with emphasis on the Argentinean scenario. VGSare a heterogeneous group including five groups of species, each one exhibiting peculiar sus-ceptibility patterns to penicillin (PEN). Species of the Streptococcus mitis group are frequentlynonsusceptible to PEN. PEN resistance is associated with changes in PEN-binding proteins. InArgentina, one to two thirds of VGS are nonsusceptible to PEN. Third generation cephalosporinsand carbapenems are currently more effective in vitro than PEN against VGS. Mortality was asso-ciated to nonsusceptibility to PEN in at least two studies involving patients with bacteremiacaused by VGS. Treatment of endocarditis due to VGS should be adjusted/to the PEN suscepti-bility of the isolates. Vancomycin may be an alternative choice for treating endocarditis causedby PEN-resistant isolates (MIC 4 g/ml).

Resumen El objetivo de esta revisión es presentar una actualización sobre la sensibilidad de los estreptococos del grupo viridans (EGV) a los antimicrobianos p-lactámicos, con énfasis en el escenario argentino. Los EGV son un grupo heterogéneo que incluye cinco grupos de especies, y cada una presenta su patrón especial de sensibilidad a la penicilina (PEN). Las especies del grupo Streptococcus mitis, con mayor frecuencia, no son sensibles a la PEN. La resistencia a la PEN se asocia con cambios de las proteínas ligadoras de PEN. En la Argentina, de uno a dos tercios de los EGV no son sensibles a la PEN. Las cefalosporinas de tercera generación y los carbapenemes son actualmente más eficaces in vitro que la PEN contra los EGV. La mortalidad se asoció con la no sensibilidad a la PEN en al menos dos estudios de pacientes con bacteriemia por EGV. El tratamiento de las endocarditis por EGV debe ajustarse según la sensibilidad a la PEN de los aislados. La vancomicina podría ser una elección alternativa para el tratamiento de las endocarditis por cepas resistentes a PEN (CIM >4 ^g/ml).

Neisseria meningitidis aislada de muestras de hombres que tienen sexo con hombres / Neisseria meningitidis isolated from patients in men who have sex with men

Resumen En los períodos 2000-2004 y 2014-2015 se investigó la presencia de Neisseria meningitidis en 1.143 y 544 hombres que tienen sexo con hombres respectivamente, atendidos en el marco de un programa de enfermedades de transmisión sexual. Se determinó la prevalencia de este agente, su distribución en serogrupos y su sensibilidad a los antimicrobianos. Se obtuvieron hisopados faríngeos, rectales y uretrales, que se sembraron en medio selectivo Thayer Martin modificado. La identificación se realizó mediante pruebas bioquímicas convencionales y por espectrometría de masas (MALDI-TOF). En el segundo período estudiado, sobre 85 aislamientos procedentes de faringes se investigaron los serogrupos B, C, W e Y mediante PCR. Se determinó la CIM de penicilina, ceftriaxona, rifampicina, azitromicina y ciprofloxacina en 66 aislamientos obtenidos en el primer período y en 102 logrados en el segundo. La prevalencia de N. meningitidis fue del 17,8% en el primer período y del 28,1% en el segundo; este microorganismo se aisló más frecuentemente de fauces. Los serogrupos hallados fueron B (31,5%), Y (7,6%) y W (3,3%), con un 9,8% de aislamientos no capsulados; los restantes corresponderían a otros serogrupos. El 34,8% y el 63,7% de los aislados estudiados correspondientes al primer y segundo período, respectivamente, tuvieron sensibilidad intermedia a la penicilina, y un 11,8% de los evaluados en el segundo período fueron resistentes a dicho antibiótico. Todos los aislados estudiados fueron sensibles a ceftriaxona y a ciprofloxacina (excepto 3, con CIM entre 0,25 y 0,5(g/ml), el 3% fueron resistentes a rifampicina y el 2% fueron no sensibles a azitromicina. La portación de N. meningitidis en hombres que tienen sexo con hombres fue elevada y hubo un alto porcentaje de cepas no sensibles a penicilina. El serogrupo B fue prevalente.

Abstract During the periods 2000-2004 and 2014-2015, Neisseria meningitidis was investigated in men who have sex with men, 1143 and 544 respectively, who consulted in the sexually-transmitted disease program. Prevalence, serogroup distribution and susceptibility to antibiotics were determined. Pharyngeal, rectal and urethral swabs were cultivated on selective Thayer-Martin modified medium. The identification was performed by biochemical tests and mass spectrometry by MALDI-TOF. Serogroups B, C, W and Y were investigated by PCR in 85 isolates recovered from the pharynx belonging to the second period. MICs of penicillin, ceftriaxone, rifampicin, azithromycin and ciprofloxacin were determined for 66 and 102 isolates from periods 1 and 2 respectively, according to CLSI. The prevalence of N. meningitidis was 17.8% and 28.1%, in periods 1 and 2 respectively; the isolates were mainly recovered from the pharynx. The distribution of serogroups was B 31.5%; Y 7.6%; W 3.3% and 9.8% non-capsulated and the rest would belong to other serogroups. Isolates classified as intermediate to penicillin were 34.8% and 63.7% (first and second periods, respectively); moreover, 11.8% of the isolates from the second period were resistant. All isolates were susceptible to ceftriaxone, to ciprofloxacin (except 3 isolates with MIC values between 0.25 and 0.5(g/ml), 3% were resistant to rifampicin and 2% were not susceptible to azithromicin. The prevalence of N. meningitidis carriage in men who have sex with men was high with a high rate of penicillin non-susceptible isolates. B was the prevalent serogroup.

Resistencia a los β -lactámicos en enterococos / Resistance to β-lactams in enterococci

Enterococci are intrinsically resistant to several antimicrobial classes and show a great ability to acquire new mechanisms of resistance. Resistance to β-lactam antibiotics is a major concern because these drugs either alone or in combination are commonly used for the treatment of enterococcal infections. Ampicillin resistance, which is rare in Enterococcus faecium occurs in most of the hospital-associated Enterococcus faecium isolates. High-level resistance to ampicillin in E. faecium is mainly due to the enhanced production of PBP5 and/or by polymorphisms in the beta subunit of this protein. The dissemination of high-level ampicillin resistance can be the result of both clonal spread of strains with mutated pbp5 genes and resistance horizontal gene transfer.

Los enterococos son intrínsecamente resistentes a varias clases de antimicrobianos y presentan una gran capacidad para adquirir mecanismos de resistencia. La resistencia a los antibióticos p-lactámicos es preocupante porque estos fármacos solos o combinados se usan comúnmente para el tratamiento de las infecciones enterocócicas. La mayoría de los aislamientos hospitalarios de Enterococcus faecium presentan resistencia a la ampicilina, la cual es rara en Enterococcus faecalis. El alto nivel de resistencia a la ampicilina en E. faecium se debe principalmente a la hiperproducción de PBP5 y/o a polimorfismos en la subunidad beta de esta proteína. La propagación de esta resistencia puede deberse tanto a la diseminación clonal de cepas con genes pbp5 mutados como a la transferencia horizontal de genes.

Identificación y sensibilidad a los antimicrobianos de aislados de estreptococos del grupo viridans provenientes de pacientes internados en un hospital universitario de la ciudad de Buenos Aires / Identification and antibiotic susceptibility of viridans group streptococci isolates recovered from patients hospitalized at a teaching hospital in Buenos Aires City

Los estreptococos del grupo viridans (EGV) son agentes causales de infecciones localizadas e invasivas. Dada la gravedad de las infecciones producidas por EGV sumada a las escasas comunicaciones actuales en nuestro país, los objetivos de este trabajo fueron la identificación y el estudio de la sensibilidad a los antibióticos de aislados caracterizados como EGV, recuperados de pacientes internados, para actualizar el conocimiento sobre el perfil de resistencia y la epidemiología de las infecciones ocasionadas por EGV. Se recuperaron 132 aislados de EGV en el Hospital de Clínicas «José de San Martín¼ en el período 2011-2015. La identificación se realizó mediante pruebas convencionales y espectrometría de masas (Matrix Assisted Laser Desorption Ionization - Time of Flight Mass Spectrometry). El grupo Streptococcus anginosus fue el más frecuente (42%) seguido por el grupo Streptococcus mitis (33%). Dentro del grupo S. mitis se excluyó a Streptococcus pneumoniae. El 100% de los aislados fue sensible a ertapenem, linezolid y vancomicina; el 96,9% a cef-triaxona y cefepima. Se encontró un 25,8% de resistencia a penicilina (I+R) fundamentalmente en aislados de grupo S. mitis. La resistencia a tetraciclina fue del 27,2% y solo 2/132 aislados fueron resistentes a levofloxacina. Los valores de CIM de gentamicina oscilaron entre 0,5 y 32 -og/ml. El 17,4% de los aislados presentó resistencia a eritromicina sin diferencia significativa en la distribución de fenotipos M y MLS. Los resultados muestran la importancia de la vigilancia continua de las infecciones producidas por estos microorganismos con el fin de generar aportes para la elección de la terapia antibiótica adecuada.

Members of the viridans group streptococci (VGS) are the cause of local and invasive infections. Due to the severity of these infections and taking into account that reports regarding epidemiological aspects are scarce, the aims of this work were the identification and the study of the antibiotic susceptibility profiles of the isolates recovered from patients that were hospitalized in order to find out about the resistance level and the epidemiology of infections in which VGS are involved. A hundred and thirty two isolates identified as VGS were isolated at Hospital de Clínicas «José de San Martín¼ during the period 2011-2015. The identification was performed by biochemical test and mass spectrometry by Matrix Assisted Laser Desorption Ionization -Time of Flight Mass Spectrometry. Streptococcus anginosus group was prevalent (42%) followed by Streptococcus mitis group (33%). In the latter, isolates of Streptococcus pneumoniae were excluded. All the VGS isolates were susceptible to ertapenem, meropenem, linezolid and vancomycin; 25.8% were resistant (I+R) to penicillin, being prevalent in the S. mitis group. Regarding ceftriaxone and cefepime 96.9% of the isolates were susceptible. Only two isolates were resistant to levofloxacin, 27.2% to tetracycline and it was not found high level resistance to gentamycin (MIC range 0.5-32 µg/ml). Resistance to erythromycin was 17.4% with no significant difference between M and MLS phenotypes. The most active antibiotics were in addition to ceftriaxone and cefepime, vancomycin, ertapenem, meropenem and linezolid. These results highlight the importance of the continuous surveillance of the infections caused by VGS in order to predict a correct antibiotic therapy.

Susceptibility to β-lactams in β-hemolytic streptococci / Sensibilidad a los β-lactámicos en estreptococos β-hemolíticos

Group A (GAS), B (GBS), c (GCS) and G (GGS) β-hemolytic streptococci are important human pathogens. They cause infections of different severity and frequency. Nowadays, after 70 years of use, penicillin is still universally active against GAS, GCS and GGS. However, therapeutic failures have been recorded in 2-28% of pharyngitis cases (median: 12%) attributable to different causes. By contrast, some GBS with reduced susceptibility to penicillin have been described, especially in Japan. In this group of bacteria, it is important to highlight that confirmation by reference methods is mandatory when decreased susceptibility to penicillin is suspected as well as checked for the detection of the mechanisms involved.

Los estreptococos β-hemolíticos de los grupos A (GAS), B (GBS), C (GCS) y G (GGS) son importantes patógenos humanos. Ellos producen infecciones de diversa gravedad y frecuencia. Aún después de más de 70 años de uso, la penicilina sigue siendo activa in vitro frente al 100% de los GAS, GCS y GGS. No obstante se han producido fallas terapéuticas entre el 2-28% de los casos de faringitis (media: 12%), atribuibles a diversas causas. En cambio se han descrito aislados de GBS con sensibilidad reducida a la penicilina, especialmente en Japón. Es importante que toda sospecha de sensibilidad disminuida a la penicilina en este grupo de bacterias sea confirmada por los métodos de referencia y comprobada mediante la detección de los mecanismos involucrados.

Sensibilidad a trimetoprima-sulfametoxazol de Streptococcus pyogenes aislados de infecciones invasivas / Susceptibility of Streptococcus pyogenes isolated from invasive infections to trimethoprim-sulfamethoxazole

Se cree erróneamente que los estreptococos del grupo A (EGA) son universalmente resistentes a trimetoprima-sulfametoxazol (TMS). Esto se debe a que la timidina presente en los medios habitualmente usados para determinar sensibilidad in vitro a antibióticos antagoniza el efecto antibiótico de TMS. El objetivo de este trabajo fue determinar la sensibilidad de EGA a TMS, en presencia y ausencia de timidina. A tal fin, fueron analizados 95 aislamientos clínicos obtenidos de tejidos normalmente estériles con infección invasiva por EGA. La pruebas de sensibilidad por difusión con discos de TMS fueron realizadas en agar Mueller Hinton adicionado ya sea con 5% de sangre de carnero (MH-SC) o con 5% de sangre equina lisada (MH-SEL). La sangre equina lisada contiene timidina fosforilasa, que degrada este nucleósido. Como método de referencia se utilizó la epsilometría (Etest). El control de calidad con la cepa Enterococcus faecalis ATCC 29212 fue satisfactorio para ambos medios. La sensibilidad a TMS por difusión fue 100% en MH-SEL; en agar MH-SC 6 (6.3%) aislamientos resultaron resistentes; por Etest todos fueron sensibles, excepto uno de esos seis que presentó sensibilidad intermedia (CIM = 1.5/28.5 μg/ml). En este aislamiento no se encontraron las mutaciones genéticas de EGA más frecuentemente asociadas a resistencia a TMS. Probablemente, si se establecieran mejores puntos de corte para difusión, específicos para EGA, podría optimizarse la correlación con métodos de dilución o con Etest, aun empleando MH-SC.

It is erroneously believed that group A streptococci (GAS) are universally resistant to trimethoprim-sulfamethoxazole (TMS). This is mainly because media commonly used for in vitro determination of susceptibility to antibiotics contain thymidine, a nucleoside that antagonizes the antibiotic effect of TMS. The objective of this work was to determine EGA sensitivity to TMS in the presence and absence of thymidine. To this aim, 95 GAS isolates obtained from clinical tissues with i nvasive infections were analyzed. Susceptibility tests were performed by diffusion with TMS discs in Mueller Hinton agar supplemented either with 5% sheep blood or with 5% lysed equine blood (MH-LEB). Lysed equine blood contains thymidine phosphorylase, which degrades this nucleoside. Epsilometry (Etest) was used as gold standard. Quality controls with Enterococcus faecalis strain ATCC 29212 were satisfactory with both media. A 100% sensitivity to TMS was found in MH-SEL whereas 6 isolates (6.3%) resulted resistant in MH-SC; only one of them was found to have intermediate susceptibility by Etest (MIC > 1.5/28 μg/ml). The genetic determinants most frequently associated to TMS resistant EGA were not found in this isolate. Probably, if more accurate GAS-specific cut-off points were established for diffusion, the correlation with dilution methods or with the Etest could be improved, even employing MH-SB.

Group B streptococcal necrotizing pneumonia in a diabetic adult patient / Neumonía necrosante por estreptococo del grupo B en un paciente adulto diabético

The aim of this report is to describe a rare case of necrotizing pneumonia due to group B Streptococcus serotype III in a relatively young male adult (48 years old) suffering from diabetes. The organism was isolated from his pleural fluid and was only resistant to tetracycline. The patient first received ceftazidime (2 g/8 h i.v.) + clindamycin (300 mg/8 h) for 18 days and then he was discharged home and orally treated with amoxicillin clavulanic acid (1 g/12 h) for 23 days with an uneventful evolution. As in the cases of invasive infection by Streptococcus pyogenes, clindamycin could prevent streptococcal toxic shock syndrome.

El objetivo de esta presentación es describir un caso raro de neumonía necrosante debida a estreptococo del grupo B serotipo III en un diabético adulto de sexo masculino relativamente joven (48 años). El microorganismo fue aislado de líquido pleural y resultó ser resistente solo a tetraciclina. El paciente recibió ceftacidima (2 g/8 h iv) + clindamicina (300 mg/8 h) durante 18 días y luego fue dado de alta, bajo tratamiento oral con amoxicilina-ácido clavulánico (1 g/12 h). Este tratamiento se mantuvo durante 23 días, con buena evolución. Como en casos de infecciones invasivas por Streptococcus pyogenes, es posible que la clindamicina haya evitado la aparición del síndrome de shock tóxico estreptocócico.

Descripción de 3 casos de infecciones de piel y tejidos blandos por Streptococcus pneumoniae / Description of 3 cases of skin and soft tissue infections caused by Streptococcus pneumoniae

El papel de Streptococcus pneumoniae como agente causal de infecciones de piel y tejidos blandos (IPTB) es inusual y de difícil interpretación clínica. Describimos 3 casos documentados (años 2010, 2011 y 2015) en pacientes internados en el Hospital Provincial de Pediatría de Misiones, detectados durante 10 años de vigilancia de enfermedades invasivas (EI). Estos casos correspondieron a 2 niñas de 8 y 7 meses y a un varón de 2 años con diagnóstico de absceso glúteo, celulitis preseptal y piodermitis, respectivamente. Todos eran eutróficos, con buen estado general al ingreso, uno de ellos seropositivo para virus de la inmunodeficiencia humana. Los aislamientos presentaron características de sensibilidad a antimicrobianos y serotipos que se enmarcaron dentro de la epidemiología local de las EI neumocócicas. A pesar de la baja frecuencia, la etiología de S. pneumoniae en IPTB debe considerarse. Nuestros hallazgos revalorizan el papel del laboratorio en el diagnóstico por cultivo y contribuyen a documentar el comportamiento de este patógeno.

The role of Streptococcus pneumoniae as a causative agent of skin and soft tissue infections (SSTI) is unusual and its clinical interpretation is difficult. We describe here three cases of SSTI due to S. pneumoniae in patients admitted to the Provincial Pediatric Hospital of Misiones, Argentina that were detected during 10 years of invasive disease (ID) surveillance documented in 2010, 2011 and 2015. These cases involved two girls aged 8 and 7 months old, and a two-year-old male child with diagnoses of gluteal abscess, preseptal cellulites and pyoderma respectively. All the patients were eutrophic and in good general condition on admission; one of them was seropositive for HIV. Antimicrobial susceptibility and serotypes were framed within the local epidemiology of invasive pneumococcal disease. Despite its low frequency, S. pneumoniae as an etiological agent of SSTI must be considered. Our findings revalue the role of the diagnostic laboratory and contribute to document the behavior of this pathogen.

Estandarización del análisis multi-locus de número variable de repeticiones en tándem para el estudio de staphylococcus aureus resistentes a meticilina aislados de la comunidad en Paraguay / Multiple-locus variable-number of tandem repeat analysis standardization for community isolates methicilineresistant staphylococcus aureus study in Paraguay

Staphylococcus aureus es un patógeno capaz de causar infecciones con amplio rango de severidad y adaptarse a diferentes tejidos. Su epidemiología es compleja, por circulación de cientos de clones a nivel mundial, lo que requiere de métodos moleculares reproducibles y de alto poder discriminatorio para la identificación de los mismos. El presente estudio tuvo como objetivo principal la estandarización del análisis multi-locus de número variable de repeticiones en tándem (MLVA) para análisis de variabilidad genética de aislados de S. aureus previamente tipificados por electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE), gold standard para tipificación de aislados. La MLVA se realizó por amplificación de 7 locus VNTR (clfA, clfB, sdrC, sdrD, sdrE, sspA y spA) por PCR. Se alcanzó un alto nivel de reproducibilidad. El empleo de cepas previamente tipificadas por análisis de secuencias multi-locus (MLST), PFGE, locus spa y cassette SCCmec, permitió validar de forma comparativa el agrupamiento generado por MLVA. Los aislados que fueron agrupados como idénticos por MLVA presentaron resultados congruentes con la totalidad de las otras técnicas moleculares y esta demostró ser más sensible que PFGE para distinguir entre aislados que presentaron patrones PFGE idénticos. La MLVA cumple todos los criterios de un método de tipificación útil.

Staphylococcus aureus is a pathogen that can produce several infections with a wide range of severity and it has the ability to adapt to different tissues. The epidemiology is complex, due to circulation of many different clones worldwide, so the analysis for its identification requires reproducible and high discriminatory power molecular methods. The aim of this study was to standardize the molecular technique multiple-locus variable number of tandem repeat analysis (MLVA) for the genetic variability analysis of S. aureus isolates, previously characterized by pulsed field gel electrophoresis (PFGE). The MLVA was made by PCR amplification of seven VNTR locus (clfA, clfB, sdrC, sdrD, sdrE, sspA y spA). A high level of reproducibility has been reached in the study. The use of isolates previously typified by multi-locus sequence typing (MLST), PFGE, locus spa and cassette SCCmec, allowed to validate the MLVA clusters comparatively. The isolates that were clustered by MLVA as the same isolate, showed the same results by other molecular techniques, and the MLVA can distinguish isolates with identical PFGE patterns. This technique meets all the criteria of a useful molecular typification technique.

Neumonía necrosante adquirida en la comunidad causada por Staphylococcus aureus resistente a meticilina ST30-SCCmecIVc-Spat019-PVL positivo en San Antonio de Areco, Argentina / Community-acquired necrotizing pneumonia caused by methicillin-resistant Staphylococcus aureus ST30-SCCmecIVc-spat019-PVL positive in San Antonio de Areco, Argentina

Community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus is the first cause of skin and soft tissue infections, but can also produce severe diseases such as bacteremia, osteomyelitis and necrotizing pneumonia. Some S. aureus lineages have been described in cases of necrotizing pneumonia worldwide, usually in young, previously healthy patients. In this work, we describe a fatal case of necrotizing pneumonia due to community-acquired methicillin-resistant S. aureus clone ST30-SCCmecIVc-spat019-PVL positive in an immunocompetent adult patient.

Staphylococcus aureus resistente a meticilina adquirido en la comunidad es la primera causa de infecciones de piel y partes blandas, aunque también puede producir infecciones graves, como bacteriemia, osteomielitis y neumonía necrotizante. Algunos linajes de S. aureus se han asociado a casos de neumonía necrotizante en el mundo, generalmente en pacientes jóvenes previamente sanos. En este trabajo comunicamos un caso fatal de neumonía necrotizante causado por el clon de S. aureus resistente a meticilina adquirido en la comunidad ST30-SCCmecIVc-spat019-LPV positivo, en un paciente adulto inmunocompetente

Dos aislamientos de Salmonella Infantis multirresistentes se comportan como hipoinvasivos pero con elevada proliferación intracelular

En este trabajo se investigó la presencia de determinantes característicos de plásmidos de virulencia en dos aislamientos clínicos de Salmonella Infantis portadores de plásmidos de multirresistencia. Además, se estudió la capacidad de invasión y proliferación en células eucariotas no fagocíticas. Ninguno de los aislamientos de S. Infantis mostró los determinantes genéticos que caracterizan a los plásmidos de virulencia para este género (operón spv). Los ensayos de invasión sobre líneas celulares eucariotas mostraron que los aislamientos de S. Infantis presentan una capacidad de invasión disminuida pero persisten y proliferan en el citoplasma, independientemente de utilizar una línea celular permisiva (HeLa) o no permisiva (NRK) para tal fin. Finalmente, no se observaron indicios microscópicos que podrían hacer sospechar un efecto bactericida de estas líneas celulares sobre los aislamientos estudiados.

Two multidrug-resistant Salmonella Infantis isolates behave like hypo-invasive strains but have high intracellular proliferation. In this work, plasmid-encoded virulence factors in two Salmonella Infantis isolates carrying multiresistance plasmids were investigated. In addition, their invasion and proliferative ability in non-phagocytic cells was studied. None of them showed the typical determinants of virulence plasmids (spv operon). The invasion assays of S. Infantis isolates on eukaryotic cells showed a decreased ability to Invade but they remained and proliferated In the cytoplasm regardless of having used a permissive (HeLa) or non-permissive (NRK) cell line. Finally, there was no microscopic evidence suggesting a bactericidal effect of these eukaryotic cell lines on the Isolates tested.

Evaluación de la actividad de diferentes antimicrobianos frente a Streptococcus pneumoniae provenientes de pacientes adultos con neumonía adquirida en la comunidad / Evaluation of different antimicrobial activity against Streptococcus pneumoniae from adults with community-acquired pneumonia

Streptococcus pneumoniae es el principal agente etiológico bacteriano de infecciones del tracto respiratorio y en los últimos años hemos asistido a la emergencia de aislamientos con múltiples resistencias. Durante los años 2008 y 2009 se estudiaron 59 aislamientos de S. pneumoniae provenientes de hemocultivos y materiales respiratorios, de pacientes con neumonía, a los cuales se les determinó la susceptibilidad a diferentes antimicrobianos. No se observó resistencia a penicilina por vía parenteral (endovenosa), amoxicilina,ceftriaxona ni carbapenemes. La resistencia a cefuroxima oral y parenteral fue 3.4% y 5.1% respectivamente. El 15.2% de los aislamientos presentó sensibilidad intermedia a la penicilina por vía oral con CIM entre 0.125 y 1 μg/ml. Sólo 1/59 aislamientos fue resistente a levofloxacina (CIM= 8 μg/ml) y sensible a gatifloxacina (CIM= 0,5 μg/ml).La resistencia a eritromicina fue 20.3% y el fenotipo predominante fue el M (eflujo) confirmado por la presencia del gen mef. La resistencia a tetraciclina fue 6.8% y no se observó resistencia a tigeciclina (CIM90= 0.5 μg/ml). Todos los aislamientos fueron sensibles a vancomicina, linezolid y rifampicina, mientras que el 21.4% presentó resistencia a trimetoprima-sulfametoxazol. En conclusión, penicilina parenteral (intravenosa) y amoxicilina, independientemente de la vía de administración, continúan siendo losantimicrobianos β-lactámicos más adecuados para el tratamiento empírico de las neumonías, mientras que los macrólidos deberían utilizarse con precaución por el alto porcentaje de resistencia. Aunque la resistencia a levofloxacina continúa baja, consideramos que deberían utilizarse en situaciones que lo ameriten y en las dosis adecuadas para prevenir la selección de mutantes resistentes.

Steptococcus pneumoniae is the main etiologic bacterial agent of respiratory tract infections and in recent years emergence of isolates with multiple resistance has been observed.During the years 2008 and 2009 we studied 59 S. pneumoniae strains isolated from blood cultures and respiratory materials from patients with pneumonia and tested theirsusceptibility to different antimicrobials. There was no resistance to parenteral penicillin (intravenous), amoxicillin, ceftriaxone and carbapenems. To oral and parenteral cefuroxime the resistance was 3.4% and 5.1% respectively; 15.2% of the isolates showed intermediate susceptibility to oral penicillin with MICs between 0.125 and 1 μg/ml. Only 1/59 isolates was resistant to levofloxacin (MIC = 8 μg/ml) but it was susceptible to gatifloxacin (MIC = 0.5 μg/ml). Erythromycin resistance was 20.3% and the predominant phenotype was M(efflux) confirmed by the presence of the mef gene. Tetracycline resistance was 6.8% and there was no resistance to tigecycline (CIM90 = 0.5 μg/ml). All isolates were susceptible to vancomycin, linezolid and rifampicin. The resistance to trimethoprim-sulfamethoxazole was 21.4%. In conclusion, parenteral (intravenous) penicillin and amoxicillin, independentlyof the way of administration, remain the antimicrobial β-lactams most suitablefor the empirical treatment of pneumonia, while macrolides should be used with caution because of the high proportion of resistance. Although levofloxacin resistance remainslow, we consider it should only be used in special situations and in adequate doses in order to prevent the selection of resistant mutants.

Obtención de mutantes dicloxacilina resistentes en Listeria monocytogenes / Isolation of dicloxacillin resistant mutants from Listeria monocytogenes

A partir de la cepa sensible de Listeria monocytogenes ATCC: 15313 se obtuvieron 10 mutantes espontáneas Dicloxacilina resistentes, indiferenciables de la cepa parenteral mediante pruebas bioquímicas convencionales y análisis electroforético de sus perfiles proteicos en presencia de detergentes. La disminución en la susceptibilidad frente a Dicloxacilina no fue en todas las cepas acompañada por una disminución paralela en la susceptibilidad frente a Penicilina G. Estudios morfológicos demostraron que algunas de las mutantes, creciendo a dosis subinhibitorias de Dicloxacilina, presentan profundas alteraciones en su morfología, entre la que se cuenta la formación de estructuras helicoidales